ฟิล์มอะซีเตตเซลลูโลส

เซลลูโลสอะซิเตทเป็นเซลลูโลสอะซิเตทที่เกิดขึ้นจาก hydroxyacetylation ของเซลลูโลส ฟิล์มที่ทำจากวัสดุนี้เรียกว่าฟิล์มเซลลูโลสอะซิเตท สามชนิดของภาพยนตร์มีการดูดซับต่ำเพื่อตัวอย่างโปรตีนซึ่งสามารถเกือบสมบูรณ์กำจัดปรากฏการณ์ "tailing" ใน electrophoresis. เนื่องจากเมมเบรนมีคุณสมบัติกันน้ำต่ำจึงมีสารละลายบัฟเฟอร์น้อยกว่าและกระแสส่วนใหญ่ในระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสจะดำเนินการโดยตัวอย่างดังนั้นความเร็วในการแยกจึงเร็วเวลาอิเล็กโตรโฟรีซิสสั้นและการบริโภคตัวอย่างมีขนาดเล็ก μ G โปรตีนสามารถแยกได้อย่างน่าพอใจ ดังนั้นจึงเหมาะสำหรับโดยเฉพาะอย่างยิ่งการตรวจจับโปรตีนผิดปกติขนาดเล็กภายใต้สภาวะทางพยาธิวิทยา

Adavantage

เมื่อเทียบกับกระดาษกรองฟิล์มเซลลูโลสอะซิเตตมีข้อดีดังต่อไปนี้:

(1) ผลการแยกที่ดี มีการดูดซับเพียงเล็กน้อยในตัวอย่างโปรตีนไม่มีปรากฏการณ์ "tailing" พื้นหลังสามารถเปลี่ยนสีได้อย่างสมบูรณ์หลังจากการย้อมสีและแถบการย้อมสีโปรตีนต่างๆสามารถแยกออกได้อย่างชัดเจน, จึงปรับปรุงความถูกต้องของการกำหนดเชิงปริมาณ

(2) ประหยัดเวลาอย่างรวดเร็ว เนื่องจาก hydrophilicity มีขนาดเล็กกว่ากระดาษกรองและผลกระทบ electroosmosis มีขนาดเล็กส่วนใหญ่ของปัจจุบันจะดำเนินการโดยตัวอย่างในระหว่าง electrophoresis, ดังนั้นความเร็วในการแยกจึงเร็วและเวลาอิเล็กโตรโฟรีซิสสั้น โดยทั่วไปอิเล็กโตรโฟรีซิสสามารถใช้45 ~ 60นาที ด้วยการย้อมสีและการขจัดสีอิเล็กโตรโฟรีซิสทั้งหมดสามารถทำได้ภายในเวลาประมาณ90นาที

(3) ความไวสูง, การบริโภคตัวอย่างน้อยลง, อิเล็กโตรโฟรีซิส refractometerสำหรับสัตว์เลี้ยงต้องการเพียง2 μ L Serum ดังนั้นจึงมักใช้เพื่อตรวจจับการเปลี่ยนแปลงของโปรตีนผิดปกติขนาดเล็กภายใต้สภาวะทางพยาธิวิทยา

(4) การใช้งานที่หลากหลาย โปรตีนบางชนิดไม่ใช่เรื่องง่ายที่จะแยกออกจากกระดาษ electrophoresis, เช่นทารกในครรภ์ Alpha globulin, lysozyme, อินซูลิน, histone ฯลฯสามารถแยกออกจากกันได้ดีโดยเซลลูโลสอะซิเตทเมมเบรน electrophoresis.

(5) ง่ายต่อการรักษาและวัดปริมาณ หลังจากอิเล็กโตรโฟรีซิสและการย้อมสีของฟิล์มอะซิเตทเซลลูโลสมันสามารถแช่ในกรดอะเซติกน้ำแข็งส่วนผสมเอทานอลหรือโซลูชั่นอื่นๆที่จะทำให้จานแห้งโปร่งใส, ซึ่งเอื้อต่อการสแกนปริมาณและการเก็บรักษาระยะยาว

ขนาด:

2*8ซม. และ8*12ซม. สามารถเลือกได้

บรรจุภัณฑ์: 50แผ่น

ฮาวทูใช้ได้ไหม

เมมเบรนเซลลูโลสอะซิเตทสามารถทำโปร่งใสหลังจากได้รับการรักษาด้วยสารละลายเอทานอลกรดอะเซติกน้ำแข็งหรือโซลูชั่นที่โปร่งใสอื่นๆซึ่งเอื้อต่อการดูดซับแสงสแกนการกำหนดรูปแบบ electrophoresis และการเก็บรักษาระยะยาวของเมมเบรน

1.วัสดุและรีเอเจนต์เซลลูโลสอะซิเตทเยื่อโดยทั่วไปมีจำหน่ายในเชิงพาณิชย์ บัฟเฟอร์อิเล็กโทรโฟเรติกที่ใช้กันทั่วไปคือบัฟเฟอร์ barbital ที่มีค่า pH 8.6โดยมีความเข้มข้นของ0.05 ~ 0.09 mol/l.

2.ประเด็นสำคัญของการดำเนินงาน

(1) pretreatment ของเมมเบรน: เมมเบรนต้องแช่ในสารละลายบัฟเฟอร์ก่อน electrophoresis. หลังจากแช่แล้วให้นำเมมเบรนออกและใช้กระดาษกรองเพื่อดูดซับสารละลายบัฟเฟอร์ส่วนเกินซึ่งไม่สามารถแห้งเกินไปได้ ทำเครื่องหมายที่มุมหนึ่ง

(2) การเพิ่มตัวอย่าง: ปริมาณตัวอย่างขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของตัวอย่างธรรมชาติวิธีการย้อมสีและวิธีการตรวจจับ สำหรับ routine electrophoresis การวิเคราะห์ของ refractometerสำหรับสัตว์เลี้ยง, Sampling line ต่อซม.ต้องไม่เกิน1 μ L.เทียบเท่ากับ60-80 μ G โปรตีน

(3) electrophoresis: สามารถดำเนินการที่อุณหภูมิห้อง แรงดันไฟฟ้า25 v/cm และกระแสกว้าง0.4 ~ 0.6 ma/cm

(4) การย้อมสี: โดยทั่วไป amino Black และ Ponceau ถูกนำมาใช้สำหรับการย้อมสีโปรตีน toluidine Blue หรือ periodate Schiff Reagent ใช้สำหรับ glycoprotein, และ * * * กรดดำหรือสีม่วงแดงใช้สำหรับการย้อมสีโปรตีนไลโป

(5) การขจัดสีและความโปร่งใส: การเปลี่ยนสีที่ใช้บ่อยที่สุดสำหรับสีย้อมที่ละลายน้ำได้คือ5% กรดอะเซติกสารละลาย สำหรับการจัดเก็บในระยะยาวหรือการสแกนการดูดซับแสงการกำหนดค่าสามารถแช่ในโซลูชันที่โปร่งใสของกรดอะเซติกน้ำแข็ง: เอทานอลสัมบูรณ์ = 30:70 (V/V)